Материалы и методы исследования

Наиболее удобным тест-объектом генетической индикации водной среды являются рыбы как типичные гидробионты, присутствующие повсеместно в наших водоемах. Тест-системой для проведения эколого-генетического мониторинга является микроядерный тест, предусматривающий учет количества микроядер (мутаций) в клетках рыб. Данный тест объективно характеризует частоту хромосомных нарушений в ходе митоза, а именно: разрывы хромосом, отставание отдельных хромосом в ходе деления клеток. Подходящими клетками для анализа являются эритроциты крови, которые у рыб имеют достаточно крупные размеры и обладают ядром. Таким образом, рыбы могут играть роль модельных объектов при определении потенциально опасных для человека генотоксичныих веществ в воде (Журков, Фельдт, 1989).

В ходе практики в водоёмах находящихся вблизи биостанции Ажендарово был проведён отлов экземпляров серебряного карася. Непосредственно после отлова у каждого экземпляра были отобраны образцы цельной крови из сосудов хвостового стебля. Каплю крови немедленно помещали на чистое, обезжиренное предметное стекло с последующим приготовлением мазка. После высыхания на воздухе зашифрованный препарат фиксировали в этаноле в течение 30 мин. Известно, что для оценки качества среды могут быть использованы разные подходы (Гольдберг, 1937). Помимо прямого определения содержания и концентраций различных химических и радиационных загрязнителей среды, особое значение отводится системе биологической индикации, главным компонентом которой является эколого-генетический мониторинг, позволяющий в наиболее полной мере оценивать качество экологических параметров конкретной среды. Микроядра в микроскопе видны как небольшие округлые, без острых углов, но с чётким контуром, густо окрашенные тельца, реже - замкнутые или разорванные кольца. «Истинное» микроядро должно быть видно в эритроците, обычно ближе к периферии и находиться в фокусе, когда чётко виден контур эритроцита. (Кассирский, Алексеев, 1970). При смещении объектива микроскопа «истинные» микроядра не должны сдвигаться относительно контура эритроцита. Если в поле зрения между эритроцитами много осажденных гранул красителя, то такой препарат нельзя использовать для микроядерного анализа. Окрашивание препаратов проводили в течение 15 мин. 5% раствором красителя Гимза (Merk), приготовленного на фосфатном буфере pH - 6,8. Окрашенные препараты промывали дистиллированной водой и сушили на воздухе. Цитогенетический анализ проводили под световым микроскопом Nikon eclipse - E200 с использованием увеличения х 1000. От каждого экземпляра анализировали по 1000 полихроматофильных эритроцитов. Оценку достоверности различий по изучаемым цитогенетическим параметрам проводили непараметрическим методом с использованием критерия Манна-Уитни

Рисунок 2. Микрофотография препарата цельной крови Серебряного карася (х 400)

Рисунок 3. Микроядро в эритроците Серебряного карася (х 1000)

Еще статьи по экологии

Расчет рассеивания примесей в атмосферном воздухе
тмосфера Задание 1 Определить максимальное значение приземной концентрации вредных веществ при выбросе нагретой газовоздушной смеси из одиночного источника с круглым устьем при неблаг ...

Оценка воздействия на окружающую среду проектируемого производственного здания для инсинераторных установок
Одним из принципов охраны окружающей среды является обязательность оценки воздействия на окружающую среду при принятии решений об осуществлении хозяйственной и иной деятельности (ст. 3 ФЗ «Об ох ...

Экологическая компетенция подростков
Значительная роль в просвещении, связанном с проблемами окружающей природной среды, принадлежит общеобразовательному и дополнительному учреждению, именно в нем изучаются основы наук, на баз ...